Komórki dendrytyczne są genetycznie modyfikowane w celu ekspresji hamowania zapalenia stawów indukowanego kolagenem przez IL-4 cd

W celu barwienia MHC klasy II, DC barwiono anty-l-Eq (BD PharMingen), a następnie skoniugowaną z PE anty-mysią IgG, F (ab.) 2 (Boehringer Mannheim, Indianapolis, Indiana, USA). Analizę cytometrii przepływowej przeprowadzono za pomocą sortera komórek Elite (Coulter Electronics Ltd., Hialeah, Floryda, USA). Transdukcja retrowirusowa pierwotnych komórek T i linia komórkowa NIH 3T3. Limfocyty T wzbogacono w … [Read more…]

Komórki dendrytyczne są genetycznie modyfikowane w celu ekspresji hamowania zapalenia stawów indukowanego kolagenem przez IL-4 ad

Potencjał terapeutyczny IL-4 został również zbadany w zwierzęcych modelach zapalenia stawów, w szczególności wywołanego kolagenem zapaleniu stawów (CIA). CIA jest hamowana przez IL-4 podawaną w sposób ciągły przez wszczepione pompy (18) lub przez leczenie komórkami jajnika chomika chińskiego wytwarzającego IL-4 (19). Ostatnio doniesiono, że nadekspresja IL-4 w adenowirusowych wektorach w stawach kolanowych myszy z CIA … [Read more…]

Komórki dendrytyczne są genetycznie modyfikowane w celu ekspresji hamowania zapalenia stawów indukowanego kolagenem przez IL-4

Komórki dendrytyczne (DC) są wyspecjalizowanymi komórkami prezentującymi antygen, które migrują od obwodu do tkanek limfoidalnych, gdzie aktywują i regulują limfocyty T. Modyfikacja genetyczna DC w celu ekspresji cząsteczek immunoregulacyjnych zapewniłaby nową strategię immunoterapeutyczną dla chorób autoimmunologicznych i innych. Opracowaliśmy DC pochodzące z szpiku kostnego, które eksprymują IL-4 i przetestowaliśmy zdolność tych komórek do kontrolowania mysiego … [Read more…]

Komórkowa angiopoetyna-1 z mastocytów-1 odgrywa kluczową rolę w rozwoju guzów plazmatycznych ad 8

Immunohistochemiczne wykrywanie Ang-1 przeprowadzono na skrawkach z tkanek zatopionych w parafinie utrwalonych w 10% obojętnym buforowanym roztworze formaliny (Sigma-Aldrich) przy użyciu biotynylowanej detekcji HRP streptawidyną (Vector Laboratories Inc.). W celu wykrycia Ang-1 odzyskiwanie antygenu przeprowadzono przez ogrzewanie skrawków tkankowych w kuchence mikrofalowej przez 10 minut, a niespecyficzne wiązanie zapobiegano przez inkubację z PBS zawierającym 2% … [Read more…]

Komórkowa angiopoetyna-1 z mastocytów-1 odgrywa kluczową rolę w rozwoju guzów plazmatycznych ad 7

Pożywka hodowlana linii komórek nowotworowych składała się z pożywki RPMI 1640 zawierającej 10% FBS, 50. M 2-merkaptoetanolu; TEPC1165SZ wymagał IL-6 (5 ng / ml). Komórki tuczne komórek szpiku kostnego, otrzymane od myszy C57BL / 6 (National Cancer Institute), hodowano z 10 ng / ml IL-3 (są one tu określane jako BMMC) lub ze 100 ng … [Read more…]

Komórkowa angiopoetyna-1 z mastocytów-1 odgrywa kluczową rolę w rozwoju guzów plazmatycznych ad 6

Jednakże nie wykazano wcześniej, że unikalny udział komórek tucznych w rozwoju nowotworu nie został wykazany. Ponadto wiadomo, że komórki tuczne są źródłem cytokin i czynników wzrostu (17, 25, 26), ale nie są źródłem Ang-1. Tutaj pokazujemy, że 3 różne typy pierwotnych komórek mastocytów wyrażają Ang-1. Angiopoetyny reprezentują rodzinę wydzielanych białek, które zostały połączone z regulacją … [Read more…]

Komórkowa angiopoetyna-1 z mastocytów-1 odgrywa kluczową rolę w rozwoju guzów plazmatycznych ad 5

Barwienia H & E; oryginalne powiększenie, × 10. Mikroskopowo nowotwory pochodzące z inokulacji komórek plazmatycznych TEPC1165SZ razem z komórkami tucznymi były wysoce unaczynione, podczas gdy nowotwory pochodzące z inokulacji samych komórek TEPC1165SZ zasadniczo nie były (Figura 4D). Barwienie cytochemiczne błękitem toluidyny nie pozwoliło na zidentyfikowanie komórek tucznych w obrębie nowotworów pochodzących z inokulacji samych komórek … [Read more…]

Komórkowa angiopoetyna-1 z mastocytów-1 odgrywa kluczową rolę w rozwoju guzów plazmatycznych czesc 4

Wyniki te dostarczają dowodów, że Ang-1 wytwarzany przez komórki tuczne krytycznie przyczynia się do zwiększonej neowaskularyzacji Matrigel in vivo. Figura 3 Obecność wspierająca udział pochodzącej z komórki tucznej. Ang-1 w neowaskularyzacji in vivo. Wtyki Matrigel (0,5 ml) zawierające komórki plazmacytoma (TEPC2027, 0,5 x 106) same lub z BMMC (0,5 x 106) inokulowano sc myszami (3. … [Read more…]

Komórkowa angiopoetyna-1 z mastocytów-1 odgrywa kluczową rolę w rozwoju guzów plazmatycznych cd

Ponadto korki Matrigel zawierające komórki tuczne i komórki plazmocytomy wydają się być znacznie bardziej komórkowe niż czopki zaszczepione każdym rodzajem komórek. Stosowanie barwienia immunohistochemicznego myszy. lekki łańcuch (komórki TEPC2027 wydzielają łańcuchy a), liczne komórki plazmacytoma, często w grupach, zidentyfikowano w zatyczkach zawierających komórki tuczne plus komórki plazmacytoma, ale mniej, rozproszonych komórek pozytywnych zidentyfikowano we wtykach … [Read more…]

Komórkowa angiopoetyna-1 z mastocytów-1 odgrywa kluczową rolę w rozwoju guzów plazmatycznych ad

Zidentyfikowaliśmy ekspresję VEGF-C, PlGF i Ang-1 we wszystkich komórkach tucznych, ale nie w komórkach plazmacytoma. VEGF-D wyrażono w TEPC1165SZ i TEPC2027, a Ang-2 wykryto tylko w TEPC1165SZ. Ekspresja Ang-2 nie była wykrywalna w komórkach tucznych. Aby ocenić, czy czynniki angiogenne uwalniane z komórek tucznych mogą oddziaływać na komórki plazmocytomy, zbadaliśmy ekspresję receptorów dla VEGF i … [Read more…]