Warning: Declaration of WPRandomPostsWidget::update($new_instance) should be compatible with WP_Widget::update($new_instance, $old_instance) in /home/hydra17/ftp/operujewperu.pl/wp-content/plugins/wp-random-posts/randomposts.php on line 38
1,25-Dihydroksywitamina D3 jest ujemnym regulatorem endokrynnym układu renina-angiotensyna cd – Chirurg operuje w peru

Chirurg operuje w peru

1,25-Dihydroksywitamina D3 jest ujemnym regulatorem endokrynnym układu renina-angiotensyna cd

5 września 2019 by admin

Po inkubacji ze skoniugowanym z peroksydazą anty-króliczym IgG (Kirkegaard & Perry Laboratories Inc., Gaithersburg, Maryland, USA), sygnał reniny wizualizowano za pomocą zestawu substratu peroksydazy DAB (Vector Laboratories Inc., Burlingame, California, USA), a następnie barwienie kontrastowe hematoksyliną. Izolacja RNA i Northern blot. Nerkę i wątrobę wycięto i natychmiast umieszczono w odczynniku Trizol (Invitrogen Life Technologies, Carlsbad, Kalifornia, USA) w celu całkowitego wyizolowania RNA zgodnie z instrukcją producenta. Aby określić ekspresję mRNA dla reniny lub angiotensynogenu, całkowite RNA (20 .g / ścieżkę) rozdzielono na 1,2% żelu agarozowym zawierającym 0,6 M formaldehyd, przeniesiono na nylonową membranę transferową (Micron Separations Inc., Westborough, Massachusetts, USA), i sieciowany w ultrafioletowym łączniku krzyżowym (Bio-Rad Laboratories Inc., Hercules, California, USA). Hybrydyzację przeprowadzono jak opisano wcześniej (25). Sondy cDNA mysiej reniny i angiotensynogenu znakowano 32P-dATP (ICN Biomedicals Inc., Costa Mesa, Kalifornia, USA) przy użyciu systemu znakowania Prime-a-Gene (Promega Corp., Madison, Wisconsin, USA). Po hybrydyzacji i przemyciu membrany eksponowano na promieniowanie rentgenowskie w temperaturze -80 ° C w celu autoradiografii. Względną ilość mRNA określono ilościowo przy użyciu PhosphorImager (Molecular Dynamics, Sunnyvale, California, USA) i znormalizowano za pomocą mRNA 36B4, jak opisano poprzednio (25). Kultura komórkowa As4.1 i transfekcja. Komórki As4.1 (American Type Culture Collection, Manassas, Virginia, USA) hodowano w DMEM uzupełnionym 10% FBS w 37 ° C i 5% CO2. W celu przejściowej transfekcji komórki hodowano w naczyniach o średnicy 10 cm do 50% konfluencji i transfekowano plazmidem pcDNA3.1, pcDNA-hVDR lub pcDNA-PTH / PTHrPR (10 .g DNA na szalkę) standardową metodą fosforanu wapnia. Dwadzieścia cztery godziny po transfekcji komórki traktowano przez 24 godziny 5 x 10 ~ 8 M 1,25 (OH) 2D3 lub etanolem w pożywce bez surowicy lub z różnymi dawkami bydlęcego PTH (1. 34), jak wskazano. . Całkowity RNA wyizolowano i analizowano pod kątem ekspresji mRNA reniny metodą Northern blot. W celu stabilnej transfekcji komórki As4.1 transfekowano plazmidem pcDNA3.1 lub pcDNA-hVDR za pomocą odczynnika SuperFect (QIAGEN Inc., Valencia, Kalifornia, USA) i wybrano za pomocą 350 .g / ml G418 przez 2 tygodnie. Poszczególne kolonie zostały wybrane, rozwinięte i wybrane do ekspresji VDR. Stabilne klony As4.1-hVDR traktowano różnymi dawkami 1,25 (OH) 2D3 przez 24 godziny w pożywce bez surowicy, a całkowity RNA analizowano metodą Northern blot w celu zbadania ekspresji reniny. Analiza promotora genu Renin. Plazmid pR1C-4.1CAT, który zawierał 4,1 kb 5f-flankującą sekwencję mysiego genu Ren-1c (27) dostarczali KW Gross (Roswell Park Cancer Institute, Buffalo, New York, USA). Aby wytworzyć plazmid reporterowy pGL-117bp, fragment promotora reniny minimalnej 123-bp (+6 do. 117) uwolniono z pR1C-4.1CAT z Xbal i BamHI i wstawiono do miejsca Hindlll wektora podstawowego pGL3 (Promega Corp.) . W celu wygenerowania plazmidu reporterowego pGL-4.1 kb, fragment BamHI ((4,1 kb do około 118 pz) z pR1C-4.1CAT wstawiono do miejsca Bglll pGL-117bp. W celu analizy aktywności promotora genu reniny, komórki As4.1-hVDR transfekowano plazmidami reporterowymi przez elektroporację zgodnie z metodą Shi i in. (5) przy użyciu Gene Pulser (Bio-Rad Laboratories Inc.). plazmid pCMV. – galaktozydazę (a-gal) kotransfekowano jako kontrolę wewnętrzną. Jako kontrolę pozytywną zastosowano plazmid kontrolny pGL3 (Promega Corp.). Transfekowane komórki traktowano etanolem lub 10 (8 M 1,25 (OH) 2D3 w podłożu Opti-MEM (Invitrogen Life Technologies) zawierającym 2% FBS traktowanym węglem aktywnym w 4 godziny po elektroporacji, a aktywność lucyferazy oznaczano 48 godzin po początkowa transfekcja z zastosowaniem systemu do oznaczania lucyferazy (Promega Corp.). Aktywność lucyferazy normalizowano względem aktywności p-galu uzyskanej z tej samej elektroporacji i prezentowano jako indukcję krotności opartą na podstawowej aktywności pustego wektora podstawowego pGL3 określonego w tym samym eksperymencie. Analiza statystyczna. Dane przedstawiono jako średnie. SD i analizowano za pomocą testu ucznia w celu oceny istotności. Wartości P równe 0,05 lub niższe uznano za statystycznie istotne. Wyniki Ekspresja reniny i wytwarzanie plazmy Ang II są podwyższone u myszy pozbawionych VDR. Aby przetestować naszą hipotezę, najpierw poddaliśmy analizie VDR. /. myszy. Uznaliśmy, że jeśli hipoteza jest prawidłowa, ekspresja reniny powinna być zwiększona u zmutowanych myszy z powodu zakłócenia szlaku sygnałowego witaminy D. Przez analizę ilościową Northern blot stwierdziliśmy, że poziom mRNA reniny w nerkach dorosłych VDR. /. myszy były ponad trzykrotnie wyższe niż myszy z miotu typu dzikiego (ryc. 1, aib)
[więcej w: marcin mentel, krzew koki, peru bezpieczeństwo ]
[przypisy: szpital jurasza rejestracja, krzew koki, operuje w peru ]

Posted in: Bez kategorii Tagged: krzew koki, operuje w peru, szpital jurasza rejestracja

Partnerzy serwisu:



Zobacz tez:

Ekspresja wątrobowa swoistej wobec wirusa populacji limfocytów T CD8 + w przewlekłym wirusowym zapaleniu wątroby typu C. ad 9

Zrozumienie roli komórek regulatorowych w odporności antywirusowej może stanowić ważną platformę do projektowania innowacyjnych strategii re-inżynierii antywirusowych odpowiedzi immunologicznych w utrzymujących się zakażeniach. PodziękowaniaTa praca była wspierana przez. Cofin-MIUR. projekty 2002. 2003 do V.

Ekspresja poporodowa w chrząstce szklistej konstytutywnie aktywnej ludzkiej kolagenazy-3 (MMP-13) indukuje zapalenie kości i stawów u myszy ad 5

Immunohistochemię przeprowadzono na skrawkach pobranych od wybranych 5-miesięcznych myszy usuniętych z Dox podczas odsadzania (21 dni). Na seryjnych odcinkach przeciwciała przeciwko ludzkiemu MMP-13 (które reagują krzyżowo z myszą MMP-13) i neoepitopowi generowanemu przez kolagenazę w pierwotnym miejscu rozszczepienia kolagenu typu II wyraźnie wykazały obecność zwiększonego MMP-13 (Figura 3b) i nadmierne rozszczepianie kolagenu typu II (Figura ... [Read more...]

Trzustkowa komórka gwiaździstą: gwiazda rosnąca w chorobach trzustki czesc 4

Badania in vitro wskazują, że etanol i jego metabolit aldehyd octowy sprzyjają aktywacji szczurzego PaSCs i powodują peroksydację lipidów w tych komórkach (48, 49). Co więcej, witamina E przeciwutleniacza zapobiega indukowanej etanolem i acetaldehydem aktywacji PaSCs, co sugeruje, że stres oksydacyjny reguluje aktywację PaSC. Na przykład, 4-hydroksy-nonenal, wysoce reaktywny produkt peroksydacji lipidów, aktywuje podstawowe szczurze ... [Read more...]

DevURL

Polecane:

worki big bag na gruz warszawa
dieta odchudzająca

Tags

choroba hashimoto u dzieci dieta dla cukrzyków typu 2 jadłospis dwunastu gniewnych ludzi cda dzień dziecka utraconego grzybica przewodu pokarmowego jak dobrać narty dla dziecka jaki materac dla niemowlaka kokaina produkcja krzew koki lekarz medycyny pracy opole marcin mentel metropolia peru operuje w peru peru bezpieczeństwo peru ciekawostki przelicznik spalania kalorii publiczny bank krwi pępowinowej rezonans magnetyczny cena warszawa sennik wygrana na loterii szpital jurasza rejestracja toaleta drzewa oskrzelowego trening funkcjonalny książka

Copyright © 2021 Chirurg operuje w peru.