Warning: Declaration of WPRandomPostsWidget::update($new_instance) should be compatible with WP_Widget::update($new_instance, $old_instance) in /home/hydra17/ftp/operujewperu.pl/wp-content/plugins/wp-random-posts/randomposts.php on line 38
Komórki dendrytyczne są genetycznie modyfikowane w celu ekspresji hamowania zapalenia stawów indukowanego kolagenem przez IL-4 ad – Chirurg operuje w peru

Chirurg operuje w peru

Komórki dendrytyczne są genetycznie modyfikowane w celu ekspresji hamowania zapalenia stawów indukowanego kolagenem przez IL-4 ad

1 września 2019 by admin

Potencjał terapeutyczny IL-4 został również zbadany w zwierzęcych modelach zapalenia stawów, w szczególności wywołanego kolagenem zapaleniu stawów (CIA). CIA jest hamowana przez IL-4 podawaną w sposób ciągły przez wszczepione pompy (18) lub przez leczenie komórkami jajnika chomika chińskiego wytwarzającego IL-4 (19). Ostatnio doniesiono, że nadekspresja IL-4 w adenowirusowych wektorach w stawach kolanowych myszy z CIA zapobiegała zniszczeniu chrząstki i erozji kości (22, 23). W RA wstępne badania fazy I zaczęły wykorzystywać systemowe podawanie IL-4 przez wielokrotne wstrzyknięcie. W niniejszym badaniu zbadaliśmy wpływ DC pochodzących z szpiku kostnego genetycznie zmodyfikowanych w celu ekspresji IL-4 na CIA u myszy. Stwierdziliśmy, że pojedyncze wstrzyknięcie dootrzewnowe niewielkiej liczby DC poddanych transdukcji IL-4P znacząco zmienia przebieg zapalenia stawów. Efekty funkcjonalne dobrze korelowały ze skutecznością różnicową migracji DC z różnych miejsc wstrzyknięcia do śledziony. Zgodnie z naszą wiedzą, jest to pierwszy raport oceniający immunoterapię z zastosowaniem retrowirusowych stransdukowanych DC dla choroby autoimmunologicznej. Metody Myszy. Męskie myszy DBA / LacJ, w wieku 7. 8 tygodni, zakupiono w The Jackson Laboratory (Bar Harbor, Maine, USA). Myszy utrzymywano w Oddziale do Laboratoryjnej Medycyny Zwierzęcej Uniwersytetu Michigan. Procedury dotyczące stosowania zwierząt zostały zatwierdzone przez Komitet ds. Wykorzystania i opieki nad zwierzętami Uniwersytetu Michigan. Pożywka do hodowli. Kompletna pożywka (CM) składała się z RPMI 1640 uzupełnionej 10% dezaktywowaną termicznie FCS, 0,1 mM aminokwasów nieistotnych, 1. M pirogronianu sodu, 2 mM L-glutaminy, 100 U / ml penicyliny, 100. G / ml streptomycyny, i 5 x 10 5 M 2-ME (wszystkie z Life Technologies Inc., Grand Island, Nowy Jork, USA). Pożywka dla limfocytów (LM) składała się z pożywki Click. S (Life Technologies Inc.) uzupełnionej 1% inaktywowaną termicznie surowicą mysią, penicyliną, streptomycyną i 2-ME. LM zastosowano do hodowli komórek śledziony lub komórek węzłów chłonnych od myszy, które otrzymały iniekcje DC, w celu uniknięcia odpowiedzi na składniki FCS. Konstrukcja wektora retrowirusowego. W niniejszym badaniu zastosowano retrowirusowy konstrukt wektorowy (pRET6), który zawiera długie końcowe powtórzenia pochodzące z mieloproliferacyjnego wirusa mięsaka, jak również gen oporności na puromycynę. cDNA kodujący mysią IL-4 uzyskano z pNGVL3-mIL-4 (Vector Core, University of Michigan, Ann Arbor, Michigan, USA). W celu skonstruowania wektora retrowirusowego mIL-4 (pRET6-IL-4) fragment mIL-4 o długości 443 bp wycięto EcoRV i Not I z pNGVL3-mIL-4 i subklonowano do wektora pBluescript (Stratagene, La Jolla, Kalifornia, USA). Fragment Xho I i Not I z pBluescript-mIL-4 następnie subklonowano do pRET6. Podobnie, cDNA kodujący wzmocnione białko o zielonej fluorescencji (EGFP, otrzymany z pEGFP-1, CLONTECH, Palo Alto, Kalifornia, USA) subklonowano do pRET6, aby utworzyć pRET6-EGFP. Amfotropiczna linia komórek pakujących Phoenix (A NXA dostarczona przez G. Nolana, Stanford University, Palo Alto, Kalifornia, USA) została przejściowo transfekowana konstruktem pRET6-mIL-4 lub pRET6-EGFP przy użyciu precypitacji wapniowo-fosforanowej. Ekotropową linię komórek pakujących GP + E86 (24) infekowano następnie filtrowanymi wirusowymi supernatantami z ANXA w obecności protaminy. Po selekcji puromycyną (4 .g / ml) te poliklonalne komórki GP + E86 zastosowano jako linie komórkowe producenta. Generowanie retrowirusowo transdukowanych DC z komórek szpiku kostnego. Szpik kostny został wypłukany z kości udowych i piszczeli oraz pozbawiony erytrocytów przez lizę w buforze hipotonicznym. Komórki szpiku kostnego (106 / ml) wysiano na 9,5 x 106 napromienionych (30 Gy) komórek produkujących w kolbach hodowlanych o objętości 150 cm2 (Becton Dickinson, Franklin Lakes, New Jersey, USA). Komórki hodowano przez 2 dni w 37 ° C, 5% CO2 w obecności 10 ng / ml rekombinowanego mysiego GM-CSF (rmGM-CSF, Immunex Corp., Seattle, Washington, USA), 10 ng / ml rekombinowanego mysiego IL -4 (rmIL-4; Schering-Plough, Kenilworth, New Jersey, USA) i 8 (ig / ml siarczanu protaminy w CM. W celu wytworzenia kontrolnych DC (pozornie transdukowanych DC), komórki szpiku kostnego hodowano wspólnie z nietransdukowanymi liniami komórkowymi GP + E86. W dniu 2, nieprzylegające komórki ostrożnie usunięto z adherentnych linii komórkowych producenta i powtórzono przy 106 / ml w CM za pomocą rmGM-CSF i rmIL-4. W dniu 5 zebrano niepadherentne komórki i DC wzbogacono przez odwirowanie z gradientami 14,5% metrizamidu (Sigma Chemical Co., St. Louis, Missouri, USA) (25). DC były płukane w HBSS przed iniekcją. Fenotyp powierzchni komórki. DC analizowano przez bezpośrednie lub pośrednie barwienie mAb na markerach powierzchni komórki. Komórki wstępnie inkubowano z 2,4 G2, szczurzym mAb anty-Fc receptora i inkubowano z mAb sprzężonymi z PE przeciw CD11c, CD40, CD80 lub CD86 (wszystkie z BD PharMingen, San Diego, Kalifornia, USA)
[hasła pokrewne: operuje w peru, peru bezpieczeństwo, sennik wygrana na loterii ]
[patrz też: choroba hashimoto u dzieci, lekarz medycyny pracy opole, toaleta drzewa oskrzelowego ]

Posted in: Bez kategorii Tagged: choroba hashimoto u dzieci, lekarz medycyny pracy opole, toaleta drzewa oskrzelowego

Partnerzy serwisu:



Zobacz tez:

Bezpośrednia regulacja przysadki mózgowej proopiomelanokortyny przez STAT3 zapewnia nowy mechanizm dla połączenia immuno-neuroendokrynnego ad 7

NT, kontrola traktowana nośnikiem. Dyskusja Nasze poprzednie obserwacje wykazały kluczową rolę STAT3 w działaniu kortykotropowym LIF (18). Rzeczywiście, nadekspresja dominujących negatywnych form STAT3 zniosła indukowaną przez LIF aktywność promotora POMC, ekspresję mRNA POMC i wydzielanie ACTH (18). Co ciekawe, wszystkie badania dotyczące regulacji genów POMC wykazały regulację poprzez miejsce egzonu-1 AP-1 za pośrednictwem szlaków cAMP ... [Read more...]

Ochronne działanie anty-C5a w apoptozie tymocytów wywołanej przez sepsę ad 5

Aktywność kaspazy-1 nie była wykrywalna, a aktywność kaspazy-8 nie ulegała znaczącemu wpływowi. Blokada C5a prawie całkowicie hamowała aktywację kaspazy-3, -6 i -9 występującą po CLP (P <0,05) (Figura 5). Figura 5 Hamowanie aktywacji kaspazy w tymocytach przez blokowanie in vivo C5a w posocznicy wywołanej CLP. Lizaty komórkowe inkubowano z substratami kaspazy: Ac-YVAD-AFC (kaspaza-1), Ac-DEVD-AFC (kaspaza-3), ... [Read more...]

Nowa generacja inhibitorów mTOR w onkologii klinicznej: jak złożoność szlaku wpływa na strategię terapeutyczną ad 6

Kilka z nich znajduje się obecnie w fazie I / II lub w fazie przedklinicznej z optymalizacją związku wiodącego. Katalityczne inhibitory mTOR, poprzez hamowanie mTORC2, zapobiegają aktywacji AKT za pośrednictwem sprzężeń zwrotnych, która wynika z hamowania tylko mTORC1. Oprócz obejścia tej konsekwencji aktywacji PI3K za pośrednictwem rapalogu, kilka innych mechanizmów leży u podstaw większej potencjalnej ... [Read more...]

DevURL

Polecane:

www.rtgzebow-warszawa.pl/cefalometria.html

Tags

choroba hashimoto u dzieci dieta dla cukrzyków typu 2 jadłospis dwunastu gniewnych ludzi cda dzień dziecka utraconego grzybica przewodu pokarmowego jak dobrać narty dla dziecka jaki materac dla niemowlaka kokaina produkcja krzew koki lekarz medycyny pracy opole marcin mentel metropolia peru operuje w peru peru bezpieczeństwo peru ciekawostki przelicznik spalania kalorii publiczny bank krwi pępowinowej rezonans magnetyczny cena warszawa sennik wygrana na loterii szpital jurasza rejestracja toaleta drzewa oskrzelowego trening funkcjonalny książka

Copyright © 2021 Chirurg operuje w peru.