Barwienia H & E; oryginalne powiększenie, × 10. Mikroskopowo nowotwory pochodzące z inokulacji komórek plazmatycznych TEPC1165SZ razem z komórkami tucznymi były wysoce unaczynione, podczas gdy nowotwory pochodzące z inokulacji samych komórek TEPC1165SZ zasadniczo nie były (Figura 4D). Barwienie cytochemiczne błękitem toluidyny nie pozwoliło na zidentyfikowanie komórek tucznych w obrębie nowotworów pochodzących z inokulacji samych komórek plazmocytomy (Figura 5A). Jednakże, rzadkie komórki zawierające toluidynę zidentyfikowano w skórze właściwej pokrywającej nowotwór (nie pokazano). W przeciwieństwie do tego, rozproszone komórki tuczne wizualizowano zarówno wewnątrz jak i na obrzeżach guzów pochodzących z inokulacji komórek plazmacytoma razem z komórkami tucznymi (Figura 5A). Barwienie immunocytochemiczne Ang-1 było ujemne w nowotworach pochodzących z inokulacji samych komórek plazmocytomy (Figura 5A). Zamiast tego, rozproszone komórki Ang-1 (3-dodatnie wizualizowano w nowotworach pochodzących z inokulacji komórek plazmacytoma razem z komórkami tucznymi (Figura 5A). Podwójne barwienie pokazujące komórkową kolokalizację błękitu toluidynowego i Ang-1 dostarczyły dowodów, że komórki tuczne w nowotworach są źródłem Ang-1 (Figura 5A, wstawka). W przeciwieństwie do komórek tucznych, monocyty i makrofagi były rzadko identyfikowane poprzez barwienie esterazy cytochemicznej w tkankach plazmocytomy pochodzących z inokulacji komórek plazmocytomy samodzielnie lub w połączeniu z komórkami tucznymi (nie pokazano). Figura 5Zakładanie komórek tucznych wydzielających Ang-lp do wzrostu nowotworu plazmocytomy. (A) Tkanki guza wybarwiono błękitem toluidynowym w celu wykrycia komórek tucznych i / lub immunobarwienia Tie-2 / Fc w celu wykrycia Ang-1. Górny rząd: Reprezentatywna tkanka nowotworowa od myszy zaszczepionej samymi komórkami plazmacytoma TEPC1165SZ, nie wykazującymi żadnych komórek pozytywnych pod względem toluidyny (oryginalne powiększenie, x 20), i od myszy zaszczepionej komórkami TEPC1165SZ plus SPMC, wykazującymi infiltrację komórkami pozytywnymi wobec toluidyny (oryginał powiększenia, × 20 i × 40). Dolny rząd: Immunobarwienie dla Ang-1 nie wykrywa dodatnich komórek w reprezentatywnej tkance guza od myszy zaszczepionej samymi komórkami TEPC1165SZ, ale wykrywa rozproszone komórki Ang-1 (dodatnie (brązowe) w reprezentatywnej tkance guza od myszy zaszczepionej SPMC ( oryginalne powiększenie, × 20 i × 40). Wstawka: kolokalizacja komórkowa barwienia błękitem toluidynowym i barwienie immunologiczne Ang-1 (oryginalne powiększenie, x 63). (B) Wielkość guza u myszy, którym wstrzyknięto sc z TEPC1165SZ z dodatkowymi BMMC, Tie-2 / Fc (50 .g na mysz), kozimi anty-mysimi przeciwciałami VEGF-A (50 .g na mysz), Tie-2 / Fc plus kozie skierowane przeciw mysim przeciwciałom VEGF-A (po 50 .g na mysz) lub ludzkiemu Fc IgG plus koza kontrolna IgG (50 .g na mysz). Było 4 myszy na grupę. Wielkość guza oszacowano w milimetrach kwadratowych w dniu 14 po iniekcji; wyniki wyrażono jako średni procent wielkości guza (